1 材料與方法
1996年12月至1997年3月,在廣西、云南采集了13個地理種源的西南樺種子。在種子凈度工作臺進行經(jīng)種子檢驗,選出種子品質、發(fā)芽率zui高的平果種源種子鋪設貯藏試驗。該批種子1997年1月3日采自廣西壯族自治區(qū)平果縣瀨江林場六伐林站。種子處理程序為,將所采果穗置于室內通風處晾干,待種子脫落后收集,去除雜質,帶回本所,經(jīng)室內自然干燥,暫時貯藏于冰箱內待用。貯藏試驗于4月2日開始。
整個試驗分3部分:(1)常溫干燥貯藏試驗,將種子用布袋包裝置于干燥器內,干燥器下部放置干燥劑(變色硅膠);(2)系列溫度貯藏試驗,設置常溫以及15、10、5、0、-5°C等處理;(3)包裝容器對種子貯藏影響試驗,設置布袋和保鮮袋包裝兩個處理,與溫度試驗結合進行。起初每隔1至2個月取種子樣品做發(fā)芽試驗,逐漸改為每半年1次。發(fā)芽試驗設置3次重復,統(tǒng)一于人工氣候箱內(25°C)進行,以便比較各貯藏方法、貯藏期的發(fā)芽特征,風選凈度儀進行測定,從而正確分析評價各種貯藏方法的有效性。
整理各貯藏期發(fā)芽試驗數(shù)據(jù),計算發(fā)芽率、發(fā)芽勢以及發(fā)芽速度,應用方差分析處理。
2 結果與分析
2.1 不同包裝對貯藏期的影響,設置布袋和保鮮袋包裝兩種處理,目的是檢驗通氣、透水性對西南樺種子貯藏的影響。布袋既透水又通氣,雙層保鮮袋不透水,對通氣性亦產(chǎn)生一定影響。方差分析結果表明,在-5°C條件下貯藏16~36個月時,兩種包裝方法對西南樺種子發(fā)芽勢、發(fā)芽速度有顯著(P=95%,下同)影響,而對發(fā)芽率影響不顯著。在試驗期間打開-5°C貯藏西南樺種子的保鮮袋,可聞到刺鼻的酸氣味,根據(jù)Willam的論述,認為可能是由于每次作發(fā)芽試驗檢查種子貯藏效果時,從冰箱凍藏室取出種子,凝結水分使種子變得濕潤,而后又較長時間通氣不暢,造成種子進行無氧呼吸的緣故。而在其它各種溫度條件下,兩種包裝方法的種子貯藏效果差異都不顯著,即用保鮮袋和布袋貯藏對種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽速度沒有顯著影響。因此在后面的溫度試驗的分析中將兩組數(shù)據(jù)合并計算。
2.2 常溫干燥貯藏效果常溫常規(guī)條件下,種子自1997年4月份始貯藏3個月即喪失發(fā)芽率。常溫干燥條件下保鮮袋貯藏,西南樺種子貯藏10個月,發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽速度未發(fā)生顯著變化。此后,由于干燥器內干燥劑吸水失效未被及時發(fā)現(xiàn),在16個月時發(fā)芽率顯著下降至58.3%。再過半年時間,即從1998年8月份至1999年2月份,發(fā)芽率降至9.0%,其下降速度較常溫常規(guī)條件下貯藏(1997年4月至7月)緩慢得多。
2.3 低溫貯藏效果低溫貯藏包括冷藏和凍藏兩種。15°C條件下保存3個月,西南樺種子發(fā)芽率未發(fā)生顯著變化,發(fā)芽勢和發(fā)芽速度顯著降低;貯藏5個月時發(fā)芽率顯著下降,由原來的80%以上下降至57.3%;貯藏7個月時發(fā)芽率僅約13%;10個月時發(fā)芽率幾乎為0。10、5、0°C條件下,種子貯藏3 a,發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽速度均未顯著下降??梢娫?0~0°C冷藏效果十分理想,10°C似乎是西南樺種子冷藏的臨界溫度。
在-5°C條件下凍藏,10個月內種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽速度未發(fā)生顯著降低。而從16個月開始,用保鮮袋貯藏的種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽速度均顯著下降,而用布袋貯藏,其下降尚不顯著。其原因已經(jīng)在前面作了敘述。一般農(nóng)作物種子基因資源長期保存的貯藏處理是-18°C的溫度和5%±1%的含水量。若將種子從冰箱凍藏室取出時先置于干燥器內一段時間,待與外界溫度一致時再取種子做發(fā)芽試驗,確保種子干燥再放回冰箱,或者在開始做種子貯藏試驗時,將種子置于多個小容器內,每次發(fā)芽試驗將一份種子全部取出,如此避免前述的情況發(fā)生,凍藏亦可應用于西南樺種子的長期保存。
3 討 論
*,無論以什么方法貯藏種子,要在可能范圍內zui大限度地保存種子的生命力,延長種子壽命,關鍵在于控制種子呼吸作用的性質和強度。干燥和低溫均能降低種子的呼吸作用。馬信祥等[7]總結了100種熱帶植物種子的發(fā)芽和貯藏試驗,發(fā)現(xiàn)小粒或細小粒種子一般耐低溫或干燥貯藏。有人將紙皮樺種子成功地貯藏在0.6%含水量條件下而不受損傷。西南樺種子屬細小粒種子,據(jù)我們對目前已經(jīng)收集的地理種源種子的測定結果,千粒重為0.069~0.145 g,平均僅約0.107 g。本項研究結果與之相符。
采用布袋和保鮮袋在除-5°C以外的各種溫度條件下貯藏西南樺種子,對種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽速度沒有顯著影響。因為種子在含水率較低時呼吸微弱,保鮮袋的通氣性能夠滿足袋內外氧氣和二氧化碳氣體交換的需要,所以貯藏效果與布袋無異。干藏亦是貯藏西南樺種子行之有效的方法之一,特別適合尚未通電或經(jīng)常停電的偏僻林區(qū)。若沒有硅膠,可以就地取材,用石灰、木炭等作干燥劑,塑料袋、陶瓷罐等作貯藏容器;或將種子置于谷倉內貯藏。
常溫常規(guī)條件下西南樺種子的有效貯藏期:在廣州為3個月,在其它地方如何,應視當?shù)氐臍鉁囟?。王達明等[3]比較昆明與普文的室溫貯藏,發(fā)現(xiàn)昆明(9.8~26.4°C)比普文(11.5~28.7°C)的貯藏效果好,即與其溫度密切相關。我們將本研究中喪失發(fā)芽率的事例與廣州的氣溫月份變化進行綜合分析,可以得出一些啟示。前面已述,西南樺在廣州常溫常規(guī)條件下貯藏3個月(1997年4月至7月)即喪失發(fā)芽能力,而在干燥劑已失效的干燥器中貯藏半年(1998年8月至1999年2月)發(fā)芽率從58.3%下降至9.0%,下降速度較前者緩慢得多。這與氣溫的月份變化密切相關。4月至7月份的月均溫為21.9~28.4°C,而8月至2月的月均溫為13.3~28.1°C,有3個月平均氣溫在15°C以下或接近15°C。從15°C條件下的貯藏情況也可以得到一些佐證。無論如何,在熱帶南亞熱帶地區(qū),西南樺在常溫常規(guī)條件下不宜久藏。
4 結 論
(1)常溫常規(guī)條件下,在廣州貯藏西南樺種子3個月(21.9~28.4°C)即喪失發(fā)芽能力。而常溫干燥貯藏,種子活力至少可以保持1 a。
(2) 15°C條件下貯藏,西南樺種子活力能保持3個月。10~0°C低溫貯藏,能保持發(fā)芽率3 a以上。10°C似乎是西南樺冷藏的臨界溫度。低溫冷藏是長期保存西南樺基因的有效方法。
(3) -5°C條件下凍藏,西南樺種子活力在16個月內沒有發(fā)生顯著變化。如果在貯藏過程中保證種子干燥,凍藏亦可長期保存西南樺種子。
(4)本試驗擬繼續(xù)下去,進一步證實10°C是否為西南樺種子長期保存的臨界溫度。
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